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2种微生物制剂防治效果比较试验设计方法研究

龙源期刊网 http://www.qikan.com.cn 2 种微生物制剂防治效果比较试验设计方法 研究 作者:李建庆 梅增霞 来源:《现代农业科技》2018 年第 02 期 摘要 为了提高大学生创新能力和综合素质,针对园艺技术和设施农业专业的大学生设计 了综合性试验“2 种微生物制剂防治效果比较的试验设计”。该试验立足专业、结合地方特色, 详细记述了试验材料准备、试验方法设计、试验结果观察记录与分析、试验结论总结,以期对 培养学生的创新能力提供帮助。 关键词 试验设计;苏云金杆菌;球孢白僵菌;生物防治 中图分类号 S476+.9 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2018)02-0143-02 在“大众创业,万众创新”的时代背景下,高等学校尤其需要重视在校大学生创新能力的培 养,对理工科学生而言,开展试验研究是提升自身创新能力的重要途径。滨州学院作为一所地 方综合院校,以应用型人才培养为主要目的,学校开设设施农业、园艺技术等专业,笔者长期 承担相关专业的植物保护学课程的讲授任务,害虫防治是植物保护学的重要内容。笔者根据长 期教学经验和地方特点设计了 2 种微生物制剂防治效果比较的综合性试验,通过试验教学的实 施,对学生创新能力的培养发挥了重要作用,有利于提高人才培养质量。 1 试验设计原则 1.1 立足专业 园艺技术和设施农业专业的大学生将来走上专业相关工作岗位,遇到蔬菜或作物的病虫害 防治工作是必然的,在开展病虫害防治工作时需树立绿色环保的理念。生物防治技术绿色环 保、可持续控制效果好,是当前病虫害防治中优先考虑的途径。因此,本试验设计主要与害虫 生物防治相关,苏云金杆菌和白僵菌是 2 种在生产中应用非常广泛的微生物制剂,本试验结合 专业特点比较 2 种微生物制剂的防治效果,让学生对最常见的这 2 种微生物制剂有直观了解, 将来在工作中可以选择使用。 1.2 结合地方特色 微生物制剂防治对象的选取应为地方危害较为严重的害虫,滨州学院地处黄河三角洲腹地 的滨州市,韭菜是当地人民喜食的传统蔬菜,韭蛆是危害韭菜的重要害虫,故选其作为防治对 象。韭蛆是韭菜迟眼蕈蚊(Bradysia odoriphaga Yang et Zhang)幼虫的俗称,隶属双翅目眼蕈 蚊科。韭蛆取食范围较广,可为害百合科、菊科、葫芦科、伞形科等 7 科 30 多种蔬菜,其中 龙源期刊网 http://www.qikan.com.cn 北方保护地的韭菜受害最重,其次为大蒜、洋葱等葱蒜类蔬菜。由于韭蛆地下危害、营隐蔽生 活及抗药性等原因,常规杀虫剂对其防治效果不理想,导致防治比较困难。生产中菜农大量使 用剧毒、高毒农药,造成韭菜的农药残留严重超标和土壤环境污染,对韭菜食用安全构成巨大 威胁。利用微生物制剂开展韭蛆的生物防治试验并比较防治效果,对大学生解决地方实际问题 和动手实践能力的培养具有重要作用[1-2]。 2 材料与方法 2.1 试验材料 韭蛆采自山东省滨州市黄河滩区赵四勿村韭菜种植基地,挑选健康且大小一致的 3 龄幼虫 用于生测。苏云金杆菌为山东富先达农药有限公司生产(8 000 IU/mg,可湿性粉剂),球孢白 僵菌菌种为生物工程学院实验室提供。 2.2 苏云金杆菌生测方法 用蒸馏水将苏云金杆菌稀释成 5 个不同浓度,稀释倍数分别为 500 倍、1 000 倍、2 000 倍、4 000 倍和 8 000 倍。依据药液浓度的不同设 5 个处理,每个处理 3 次重复,每次重复 20 头试虫,同时设清水对照一组。 用药液将滤纸浸润后铺在 9 cm 培养皿内,将韭菜剪成 2 cm 小段,于不同浓度药液中浸泡 1 min,取 6 段浸泡后的韭菜茎段放入培养皿内,然后用毛笔轻轻地移入试虫。试验过程中保 持培养皿内滤纸湿润,根据取食情况每天及时补充浸过相应浓度药液的韭菜茎。 将培养皿置于(24± 1)℃光照培养箱下培养,4、8、24、48 h 后检查结果,以毛笔轻触虫 体,幼虫不动计为死亡。记录死虫数,最后计算死亡率[3]。 2.3 球孢白僵菌生测方法 2.3.1 球孢白僵菌孢子悬浊液母液的制备。将球孢白僵菌菌种接种于白僵菌产孢培养基 (蛋白胨 10 g,麦芽汁 40 g,酵母膏 2 g,琼脂粉 20 g,加蒸馏水至 1 000 ml,在 121 ℃下高 压灭菌 30 min),25 ℃培养,球孢白僵菌大量产生孢子后,将培养皿密封放入 4 ℃冰箱内保 存备用[4]。 取 250 mL 的烧杯 1 个,先加入蒸馏水 100 mL,再加入吐温-80 200 μL,刮取球孢白僵菌 孢子粉溶入蒸馏水中,配成白僵菌孢子悬浊液母液,镜检检测孢子浓度为 2× 109 个/mL。 2.3.2 生测方法。将球孢白僵菌母液用水稀释成 5 个不同孢子浓度,分别为 2× 109 个/mL、 1× 109 个/mL、0.5× 109 个/mL、0.2× 109 个/mL、0.1× 109 个/mL,处理后于 1、2、4、6 d 检查 结果。 龙源期刊网 http://www.qikan.com.cn 依据球孢白僵菌母液稀释倍数设 5 个处理,处理及对照设置试虫的饲喂方法、试验结果统 计方法同 2.2 苏云金杆菌的生测方法。 3 结果与分析 3.1 苏云金杆菌的室内防治效果 不同稀释倍数苏云金杆菌处理不同时间对韭蛆的室内防治效果见表 1。可以看出,苏云金 杆菌可在较短时间内大量杀死韭蛆,致死率高,速效性强,是防治韭蛆较好的生物试剂。苏云 金杆菌稀释倍数越低对韭蛆的致死率越高,死亡数量越多,致死时间越短,稀释 500 倍 4 h 后 韭蛆死亡率可达 96.67%;稀释 1 000 倍 8 h 后韭蛆死亡率可达 91.67%;稀释 2 000 倍 24 h 后死 亡率达 100%。处理时间越短,不同稀释倍数处理间幼虫死亡数量差异越大,处理 4 h 稀释 500 倍韭蛆接近全部死亡,稀释 4 000 倍和 8 000 倍则零死亡;随处理时间的延长,各